實驗原理
高壓蒸汽**是將待**的物品放在一個密閉的加壓**鍋內(nèi)，通過加熱，使**鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了**器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到**的目的。
在同一溫度下，濕熱的**效力比干熱大，其原因有三：一是濕熱中細菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低（表Ⅵ-2），二是濕熱的穿透力比干熱大；三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被**物體的溫度，從而增加**效力。
一般培養(yǎng)基用1．05kg /cm2，121．3℃15—30分鐘可達到徹底**的目的。**的溫度及維持的時間隨**物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變。例如含糖培養(yǎng)基用0．56kg/cm2（8磅/英寸2），112．6℃**15分鐘，但為了保證效果，可將其他成分先行121．3℃，20分鐘**，然后以無菌操作手續(xù)加入**的糖溶液。又如盛于試管內(nèi)的培養(yǎng)基以1．05kg/cm2，121．3℃**20分鐘即可，而盛于大瓶內(nèi)的培養(yǎng)基*好以1．05kg/cm2**30分鐘。
實驗室中常用的高壓蒸汽**鍋有立式、臥式和手提式等幾種。本實驗介紹手提式高壓蒸汽**鍋的使用方法。
實驗試劑
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
實驗設(shè)備
手提式高壓蒸汽菌鍋等
實驗材料
培養(yǎng)皿（6套一包）
實驗步驟
1．首先將內(nèi)層**桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。
2．放回**桶，并裝入待**物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響**效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3．加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層**桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。
4．用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。本實驗用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘**。
5．**所需時間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓**鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出**物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
6．將取出的**培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時，經(jīng)檢查若無雜菌生長，即可待用。
注意事項
檢查培養(yǎng)基**是否徹底。