深圳菲特立科技有限公司推出德國**微生物快速檢測系統(tǒng)RVLM ,可快速定量的檢測各類致病菌。詳情請登陸www.tjshuashua.com 活菌總數(shù);
大腸菌群;
大腸桿菌;
腸道桿菌科;
金黃色葡萄球菌;
綠膿桿菌;
沙門氏菌;
李斯特菌;
腸球菌;
亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌;
產(chǎn)氣莢膜梭菌;
霉菌(曲霉屬**、曲霉菌);
酵母菌。
食品**國家標(biāo)準(zhǔn) 《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)》
前言
本標(biāo)準(zhǔn)自實(shí)施之日起代替 GB/T 4789.15-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)》。
本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T 4789.15-2003 相比，主要修改如下：
——修改了范圍；
——修改了檢驗(yàn)程序和操作步驟；
——修改了培養(yǎng)基和試劑；
——修改了設(shè)備和材料；
——修改了附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A 為規(guī)范性附錄，附錄B 為資料性附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：——GB 4789.15-1984、GB 4789.15-1994、GB/T 4789.15-2003。
食品**國家標(biāo)準(zhǔn)
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中霉菌和酵母菌（moulds and yeasts）的計(jì)數(shù)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)。
2 設(shè)備和材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)**及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：
2.1 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2.2 恒溫培養(yǎng)箱： 28 ℃±1 ℃。
2.3 均質(zhì)器。
2.4 恒溫振蕩器。
2.5 顯微鏡：10×～100×。
2.6 電子天平：感量0.1 g。
2.7 無菌錐形瓶:容量500 mL、250 mL。
2.8 無菌廣口瓶：500 mL。
2.9 無菌吸管：1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)。
2.10 無菌平皿：直徑90 mm。
2.11 無菌試管: 10 mm×75 mm。
2.12 無菌牛皮紙袋、塑料袋。
3 培養(yǎng)基和試劑
3.1 馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基：見附錄A 中A.1。
3.2 孟加拉紅培養(yǎng)基：見附錄A 中A.2。
4 檢驗(yàn)程序
。
5 操作步驟
5.1 樣品的稀釋
5.1.1 固體和半固體樣品：稱取25 g 樣品至盛有225 mL **蒸餾水的錐形瓶中，充分振搖，即為1:10稀釋液。或放入盛有225 mL 無菌蒸餾水的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打2min，制成1:10 的樣品勻液。
5.1.2 液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL 樣品至盛有225 mL 無菌蒸餾水的錐形瓶（可在瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10 的樣品勻液。
5.1.3 取1 mL 1:10 稀釋液注入含有9 mL 無菌水的試管中, 另換一支1 mL 無菌吸管反復(fù)吹吸,此液為1:100 稀釋液。
5.1.4 按5.1.3 操作程序，制備10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1 次1 mL 無菌吸管。
5.1.5 根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2 個～3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進(jìn)行10 倍遞增稀釋的同時，每個稀釋度分別吸取1 mL 樣品勻液于2 個無菌平皿內(nèi)。同時分別取1 mL樣品稀釋液加入2 個無菌平皿作空白對照。
5.1.6 及時將15 mL～20 mL 冷卻至46 ℃的馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂或孟加拉紅培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。
5.2 待培養(yǎng)待瓊脂凝固后，將平板倒置，28℃±1℃培養(yǎng)5d，觀察并記錄。
5.3 菌落計(jì)數(shù)
肉眼觀察，必要時可用放大鏡，記錄各稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的霉菌和酵母數(shù)。以菌落形成單位（colonyforming units，CFU）表示。
選取菌落數(shù)在10 CFU～150 CFU 的平板，根據(jù)菌落形態(tài)分別計(jì)數(shù)霉菌和酵母數(shù)。霉菌蔓延生長覆蓋整個平板的可記錄為多不可計(jì)。菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。
6 結(jié)果與報(bào)告
6.1 計(jì)算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)計(jì)算。
6.1.2 若所有平板上菌落數(shù)均大于150 CFU，則對稀釋度*高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以*高稀釋倍數(shù)計(jì)算。
6.1.3 若所有平板上菌落數(shù)均小于10 CFU，則應(yīng)按稀釋度*低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
6.1.4 若所有稀釋度平板均無菌落生長，則以小于1 乘以*低稀釋倍數(shù)計(jì)算；如為原液，則以小于1計(jì)數(shù)。
6.2 報(bào)告
6.2.1 菌落數(shù)在100 以內(nèi)時，按“四舍五入”原則修約，采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。
6.2.2 菌落數(shù)大于或等于100 時，前3 位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2 位數(shù)字，后面用0 代替位數(shù)來表示結(jié)果；也可用10 的指數(shù)形式來表示，此時也按“四舍五入”原則修約，采用兩位有效數(shù)字。
6.2.3 稱重取樣以CFU/g 為單位報(bào)告，體積取樣以CFU/mL 為單位報(bào)告，報(bào)告或分別報(bào)告霉菌和/或酵母數(shù)。